Hva er antibiogrammet?
Antibiogrammet er en mikrobiologisk test som brukes til å teste følsomheten til en mikroorganisme for ett eller flere antimikrobielle legemidler.
Antibiogrammet, hovedsakelig brukt på helsenivå, utføres tradisjonelt på prøver av bakteriekolonier avledet fra enheter samlet gjennom hals, urinrør, rektal eller vaginal vattpinne, eller isolert fra avføring, urin eller sputumprøver.
Utførende teknikker og antibiotikaresistens
Antibiogrammet utføres ofte med agar-diffusjonsmetoden, også referert til som Kirby-Bauer-teknikken.
Under prosedyren blir en bakterieprøve tatt fra koloniene og sådd (riktig disponert) på passende medium, der også disker som er gjennomvåt i antibiotika ved kjente konsentrasjoner (diktert av terapeutiske behov) fordeles. Platen legges deretter i en inkubator og etter en forhåndsbestemt tidsperiode (f.eks. 18 timer ved 35 ° C) kan en relativt jevn mikrobiell vekst bli verdsatt, med mer eller mindre store glorier rundt skivene av bibulært papir. Basert på størrelsen på disse inhiberingsområdene, er følsomheten av bakterien til hvert enkelt testet antibiotikum vurderes: hvis diameteren er stor er mikroorganismen følsom for stoffet (S), hvis den er liten har bakterien en mellomliggende sensitivitet (I eller MS), mens hvis den er ubetydelig eller til og med fraværende, er den undersøkte bakteriearten resistent (R) mot stoffet.For nøyaktig å bestemme bakteriell sensitivitet måles diameteren til inhiberingssonene i mm, og sammenligne verdiene oppnådd med standardverdiene for bakteriestammen.
Hvordan forhindre antibiotikaresistens
Antibiotika er IKKE effektive mot virus; typiske virusinfeksjoner er forkjølelse, influensa, laryngitt, bronkitt, kryss og mest halsbetennelse (faryngitt).
Bruk av antibiotika når det ikke er strengt nødvendig og angitt av legen, kan favorisere fenomenet antibiotikaresistens (bakterier er "antibiotikaresistente" når de ikke kan drepes av antibiotika).
MERK: det er bakterien som er resistent mot antibiotika, IKKE individet. Derfor, selv om du aldri har brukt antibiotika, kan du utvikle infeksjoner forårsaket av antibiotikaresistente bakterier.
For å forhindre utbrudd av antibiotikaresistens er det GRUNNLIGTIG å fullføre behandlingen foreskrevet av legen; selv om det føles bra, ikke slutte å ta antibiotika for tidlig.
Når haloene på de nærliggende platene under antibiogrammet smelter sammen med hverandre, anses antibiotika det er snakk om som synergistisk.
Som et alternativ til metoden som nettopp er beskrevet, kan antibiogrammet også utføres på flytende medium, og evaluerer - etter inkubasjon - turbiditeten som tilsvarer forskjellige fortynningsgrader for stoffet (se nedenfor).
Antibiogrammet har nå blitt en vesentlig undersøkelse, gitt den nå utbredte spredningen av fenomenet medikamentresistens. Hvis du velger feil antibiotika eller bruker et bredspektret legemiddel for å unngå denne prosedyren, kan du faktisk velge bakteriestammer som er motstandsdyktige mot virkningen av det samme. I artikkelen dedikert til dette emnet har vi sett hvordan denne evnen opprinnelig ervervet av spontane mutasjoner , og deretter overført til andre bakterier. Det er derfor ikke tilfeldig at oppdagelse og klinisk bruk av mange antibiotika har gått hånd i hånd med fremveksten av bakterier som er motstandsdyktige mot deres virkning. Veldig ofte er det feil ved en upassende og overdrevet bruk av disse stoffene, for eksempel for å behandle virusinfeksjoner som de viser seg å være helt ubrukelige (den eneste mulige begrunnelsen er å forhindre bakterielle superinfeksjoner hos personer i fare).
To veldig viktige parametere avledet fra antibiogrammet er MIC og MBC:
- MIC (Minimum Inhibiting Concentration): er den laveste konsentrasjonen av testforbindelsen som er nødvendig for å hemme veksten av en gitt mikroorganisme.
- MBC (Minimum Bactericidal Concentration): er den laveste konsentrasjonen av testforbindelsen som kreves for å forårsake død av mer enn 99,9% av en gitt mikrobiell populasjon.
For å evaluere MIC i faste medier ved hjelp av antibiogram antas det at det mikrobielle middelet diffunderer fra disken til agaren og skaper en konsentrasjonsgradient; følgelig, jo lenger borte fra disken, jo lavere konsentrasjon av legemidlet, som gradvis avtar til det når den kritiske konsentrasjonen (minimum hemmende konsentrasjon tilnærmet MIC). Utover dette punktet er det konfluent vekst, mens det i området nærmest disken ikke er noen vekst.
I antibiogrammet på flytende medium tilberedes en serie prøverør som inneholder dyrkningsmediet og skaleringsfortynninger (i forholdet 2) av antibiotikaet som skal testes. I hvert av disse reagensrør inokuleres en standard mengde av mikrober som undersøkes; inkubasjon og undersøkelse av det samme følger. Som forventet er bakterievekst i nærvær av grumlighet synlig, mens en løsning som forblir klar, angir en fullstendig hemming av mikrobiell vekst, som understreker den optimale effekten av stoffet. I dette tilfellet representerer MIC (minimum hemmende konsentrasjon) den høyeste fortynning (dvs. den laveste konsentrasjonen) av antibiotika som er i stand til å fullstendig hemme veksten av mikroorganismen. MBC (minimum bakteriedrepende konsentrasjon) bestemmes i stedet ved å dyrke prøvene som er tatt fra det flytende mediet i et egnet fast medium og vurdere eventuell bakterievekst. MIC vil derfor tilsvare konsentrasjonen av antibiotika som er tilstede i reagensglasset der legemidlet er mest fortynnet og som ved kulturell undersøkelse ikke viser tegn til bakteriell aktivitet (se figur).
Resultatene av antibiogrammet er publisert på en spesifikk rapport, som angir antibiotika som brukes og de relative MMC -ene; noen ganger er kombinasjonene av antibiotika som kan brukes og graden av resistens av mikroorganismer også oppført.
De tradisjonelle metodene for å utføre antibiogrammet, som er veldig nyttige for didaktiske formål, er i stadig utvikling. I dag er for eksempel automatiserte kommersielle systemer tilgjengelige, mens de bibulous papirskivene kan erstattes av strimler som inneholder inkrementelle doser antibiotika, passende angitt på selve stripen (E-test for antibiogram).